你知道,植物的体细胞杂交是先要把植物的细胞壁去掉,通过一定的刺激来达到两个体细胞融合,进而达到杂交的过程,同时,还要通过植物细胞的全能性来把融合后的植物利用培养基培养出来。这里有去细胞壁、细胞融合、细胞培养的三个过程,这些过程中,要是有细菌存在,那么会污染培养基和培养品不说,可能还会对实验进程产生难以预料的影响,所以要在无菌条件下进行植物细胞杂交。实际上,没有一个生物实验是不要求在没有污染的条件下进行的,只不过要求的等级不同罢了。
植物组织培养为什么要无菌条件
因为组织培养一般都是切片的。如果有细菌,容易造成感染,这样就得不偿失了!
植物组织培养强调无菌操作的原因是在植物组织培养过程中,用到富含营养物质的培养基,这是培养物得以生长.但在培养过程中,由于外植体带菌、培养瓶和各种器械面均不彻底、操作人员操作不规范等原因,使得许多杂菌进入培养基中,并在上面迅速生长.杂菌的生长一方面会与目标培养物竞争营养,从而使其失去营养;另一方面会产生大量对目标培养物有害的物质,导致其不能正常生长甚至死亡.所以要强调所用器械的缅军和实验人员的无菌操作.
植物组织技术为什么要无菌操作,怎样做到无菌我现在高二,正在做植物组培实验。
虽然还没看到愈伤组织(接种后第三天),但恐怕有的已经被微生物感染了。
严格做到无菌并不容易,所以要大量实验(做好失败的心理准备)。
要知道MS培养基的成分不仅适用于植物,而且也适用于微生物。微生物抗逆境能力强,无处不在,所以要从多方面降低被微生物感染的几率。具体如下:
1.配置MS培养基时,器具、母液都要高压蒸汽灭菌。
2.接种前要依据不同植物以及植物器官的不同,做相应的处理。例如:我现在做非洲紫罗兰,就先要用洗涤灵初步洗涤,用毛笔刷掉附着在植物体上的异物,清水漂洗,75%酒精溶液浸泡25s,再次漂洗,2%次氯酸钠溶液浸泡15min,很后在漂洗五次,才能接种。(还可以用氯化汞、次氯酸钙、双氧水进行消毒,也有使用抗生素的,不过抗生素会对有的植物体有些副作用)
3.接种在超净工作台上进行,使用前使用紫外灯照射半小时,并打开空气净化和循环设备。
4.操作员身着白大褂,换好拖鞋,接受风淋,吹落灰尘才可进入工作台。用酒精将台面、手进行消毒。接种过程中的镊子、刀片等都要在酒精灯上灼烧灭菌。当然,接种全程要在酒精灯旁进行。
5.培养室要注意空气流通。
如图,被感染的植物
植物组织培养为什么要创设无菌环境?开放式组织培养是使植物组织培养脱离严格无菌的操作环境.在自然、开放的有菌环境中进行操作,从根本上简化组培环节,降低组培成本。目前,这项技术很受欢迎。通过抑生素的应用.不用高压灭菌和超净工作台接种,在不影响组培效果的情况下,能够将污染率控制在10%以下的可接受范围内。优缺点:1.快速繁殖某些稀有植物或有较大经济价值的植物.依靠自然条件在较短时间内繁殖稀有植物和经济价值较高的植物,受到地理环境和季节的限制,很难达到快速、高效的目的;特别对于在短时期内需要达到一定数量,才能创造应有价值的植物,时间就是效益,只有通过组织培养的方法才能满足这一要求。2.脱毒植物中有很多都带有病毒,严重影响植物的产量和品质,给农业带来灾害。特别是无性繁殖植物,如马铃薯、草莓、大蒜、康乃馨等,由于病毒是通过维管束传导的,因此利用这些植物营养器官繁殖,就会把病毒带到新的植物个体上而发生病害。但是也证明感病植株并不是每个部位都带有病毒,如茎尖生长点尚未分化成维管束的部分,可能不带病毒。若利用组织培养法进行茎尖培养,再生的植株有可能不带病毒,从而获得脱病毒的苗,再用这种苗进行繁殖,则种植的植物就不会或极少发生病毒病。3.植物种质资源的保存、挽救濒于灭绝的植物长期以来人们想了很多方法来保存植物,如储存果实,储存种子,储存块根、块茎、种球、鳞茎;用常温、低温、变温、低氧、充惰性气体等,这些方法在一定程度上收到了好的或比较好的效果.植物组织培养结合超低温保存技术,可以给植物种质保存带来一次大的飞跃。因为保存一个细胞就相当与保存一粒种子,但所占的空间仅为原来的几万分之一,而且在-193度的液氮中可以长时间保存,不像种子那样需要年年更新或经常更新。4通过花药和花粉培养获得单倍体植株、缩短育种年限通过花药和花粉组织培养可以获得单倍体植物,大大缩短了育种时间。使新品种的培育过程大大简化5胚胎培养的应用在远源杂交中,杂交后形成的胚珠往往在未成熟状态时,就停止生长,不能形成有生活力的种子,因而杂交不孕,这给远缘杂交造成极大困难。十九世纪二十年代末,Laibach用胚培养技术培养亚麻种间杂种胚,*一个获得了杂种植物,这一成功为在远缘时克服杂交不亲和的障碍提供了一项有用的技术。、6细胞融合通过原生质体融合,可部分克服有性杂交不亲和性,而获得体细胞杂种,从而创造新种或育成优良品种。7培养细胞突变体的应用培养细胞处在不断分生状态,它就容易受培养条件和外加压力(如射线、化学物质)的影响而产生突变,从中可以筛选出有用的突变体,从而育成新品种。目前用这种方法已经筛选到抗病、抗盐、高蛋白、高产等突变体,有些已经用于生产。8用于遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、基因工程、生物工程等地研究缺点:1.付出的代价高2.占的空间大.3.保存时间短.4.受环境条件的限制
为什么植物组织培养要在无菌的条件下进行用俗话说就是, 孩子成长的好坏也跟环境有关, 让个植物被一群细菌围绕,那培养基里的营养都被细菌用掉了, 植物能长好吗.
评论1:微生物繁殖会消耗营养,产生毒素,导致植物组织培养失败.